白及种子液体培养成苗
白及种子液体培养成苗的过程如下1:
种子采集与处理

选取开花授粉 15 周后未开裂的白及蒴果,在超净工作台上用 75% 乙醇进行表面消毒 30s,去离子水冲洗 1-2 次。用解剖刀及镊子剥开果实,将种子抖落到无菌组织培养瓶中,加适量 5% 的次氯酸钠溶液(滴加 1-2 滴吐温 - 20)消毒 20min,再用灭菌的 50 目细胞筛过滤种子,用去离子水冲洗、过滤,反复 4-6 次。
液体培养萌发
将过滤后的种子以 MS+1.0mg/L TDZ+30g/L 蔗糖、pH5.8 的种子萌发液体培养基冲洗到三角瓶内,于 25℃、100r/min 黑暗培养。通常培养 5d 后种子即可萌发,此时转入 16h/8h 的光周期环境下光照培养,一般接种 15d 后种子发育形成叶片。
固体诱导成芽
将已萌发的白芨种子经 50 目细胞筛滤去液体,把种子原球茎接种于 MS+0.2mg/L 6-BA+30g/L 蔗糖 + 6g/L 琼脂、pH5.8 的固体诱导成芽培养基上,于 25℃、16h/8h 光周期培养。一般培养 30d 后,幼芽可生长为约 2cm 高、根长约 0.5cm 的幼苗。
生根培养
将幼苗接种到 1/2 MS+0.1mg/L NAA+30g/L 蔗糖 + 2g/L 活性炭 + 6g/L 琼脂、pH5.8 的固体生根培养基上,于 25℃、16h/8h 光周期环境培养 30d,可生长为健壮成苗。
炼苗移栽
当白芨幼苗的根生长到 3-5cm 时即可炼苗移栽。栽前先揭开瓶盖适应外界环境 3-5d,移栽时用清水洗净根部琼脂,将健壮的白芨组培苗移栽到装好育苗基质的穴盘中,栽后基质浇透水,于炼苗棚中培养。棚中前期注意弱光保湿,移栽 15d 后白芨成苗即生长正常,移栽 30d 左右即可定植。
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